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嗜熱脂肪芽孢桿菌菌種說明

  嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillus stearothermophilus)屬嗜熱性需氧芽孢桿菌,但兼有厭氧的特性,細菌繁殖體G蘭氏染色陽性呈紫色,細菌芽胞孔雀綠著色。嗜熱脂肪芽孢桿菌比較容易識別且對人體沒有危害性,一般作為空間消毒的指示生物。
  主要特性
  嗜熱脂肪地芽孢桿菌營養細胞呈長桿狀、圓端,多數為單個、少數成對或鏈狀排列,細胞寬 0. 6 ~ 1.μm、長 2. 0 ~ 3.5μm,細胞壁為革蘭陽性結構,但染色可在陽性和陰性之間變化。芽孢呈橢圓或柱狀、端生或次端生,孢囊膨脹或不膨脹,無伴孢晶體形成。較佳生長溫度為 56 ~ 60℃,較高生長溫度為 65 ~ 75℃,較低生長溫度為 30 ~ 45℃,需氧或兼性厭氧,利用葡萄糖產酸不產氣。現中國工業微生物菌種保藏管理中心( CICC) 收藏菌株為嗜熱脂肪地芽孢桿菌編號為 CICC 10267 株,即 ATCC 7953 株,其在營養瓊脂上56℃培養 24h 的菌落形態呈淺黃色,表面粗糙濕潤,邊緣不整齊 ; 該菌株在 Cook等產孢培養基上 56℃培養 24 h,取菌苔涂片經芽孢染色法染色后,1 000倍光學顯微鏡下觀察到多數仍為染成紅色的繁殖體與部分已經形成染成藍色的芽孢形態 ; 在產孢培養基上 56℃培養 5 d,鏡下觀察到 90% 以上為已經形成染成藍色的芽孢,只有少數是染成紅色的繁殖體。
  培養基
  營養瓊脂培養基(NA)
  胰蛋白胨大豆肉湯培養基(TSA)
  培養基(以上三款任選一種即可)
  保藏條件
  斜面菌種和凍干菌種應在 2-8°C 保存。西林瓶請放-20°C 保存。
  注意事項
  凍干首次活化,干粉要全部用完,不能預留,用 0.1-0.2ml 的培養液或無菌水溶解,接種在 1-2 個斜面上,因凍干粉處于休眠狀態,請勿接種多支斜面或平板,以避免因接種量不足而導致復蘇不成功;如有不明白之處,請務必先咨詢我單位技術人員,避免不必要的損失;
  微生物菌種應保藏于低溫、清潔干燥的地方,室溫放置時間過長會導致菌種衰退;
  菌種操作應在無菌條件下進行;轉種完畢,應經滅菌再做丟棄處理;
  斜面菌種保藏時間通常為 3-6 個月;應根據菌種狀況及時轉接;凍干菌種保藏時間通常為 2-25 年;
  菌種使用過程中如出現雜菌污染或菌種生產性能下降,應及時和中國微生物菌種查詢網聯系。
  六、單層凍干管打管說明書
  安瓿瓶開封:用浸過 75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量(2-3滴)無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口處在火焰上過一遍,并保持在火焰旁操作。
  注意事項:菌種活化前,請將安瓿管保存在 4-10℃的環境下,某些菌種經過冷凍干燥并抽真空保存的,,開啟后必須一次使用完,不能留菌粉下次使用;另外,安瓿管里大部分是用牛奶作為保護劑,里面菌體為少數,復蘇時要全部菌懸液接在新鮮培養基上,否則可能造成復蘇不成功;
  凍干菌種經過冷凍干燥保存后處于休眠狀態,有時延滯期較長,如在說明書建議的培養時間還未長起來,請繼續在相應的環境下多培養 24 小時或者更長時間,直至菌種培養完成;有的菌種需要連續兩次繼代培養才能正常生長,一般來說,菌種穩定后才能用于您的后續實驗。
  暫不啟開的安瓿管應于 4℃中保藏(特殊除外)。
  凍干管打開后需一次用完,不能留存。
  打管操作需由專業微生物技術人員在相應的防護設備中進行,生物危害程度為三類的菌種應在生物安全柜中操作,打管時凍干管應遠離面部,保護眼睛。
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